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Maldi-tof的测试参数

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Maldi-tof(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)是近年来在分析大分子物质分子量及蛋白、多肽结构等领域应用极为广泛的一种表征手段。它能够对大分子物质进行精准的分子量测定,尤其适用于分子量在几万至十几万分子量区间的物质,可实现直接测量。然而,想获得理想的测试结果,需依赖与之相匹配的测试参数,参数的好坏有时甚至直接决定了测试结果的成败。以下将介绍一些常见控制参数及其对数据的影响。
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基质

Maldi-tof即基质辅助激光解吸飞行时间质谱,在这里基质和激光从名称中就能必然了解是一个关键性参数。Maldi-tof通过基质传导电子给目标样品方式来实现样品的离子化,只有离子化后的物质才能有效的在质谱检出。但是基质的选择目前并没有一个固定的方式,这个取决于样品的情况,多属于经验性的总结。以下总结了一些常见的基质以及适应的样品:

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激光条件

这是第二个关键的控制条件,除了基质传递电子来离子化,也需要激光来实现样品的电离和分离,一般就是直接用强激光照射样品(如下图)。对于激光参数来说,一般能调节比较少,且与设备和激光器有关。一般常见的采用655nm、658nm等,能量强度需要看设备和谱图质量。一般过强的激光有可能导致样品碎裂,太弱的能量有可能不出峰,具体需要根据样品实际情况进行调整。

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采集次数

Maldi-tof谱图是一种数据的信号叠加图,通过多次采集的数据叠加得到输出结果,因此测试次数越多理论上得到的结果越好。但是需要考虑到经济效率的问题,一般常见的设置在5000-10000次左右。

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样品的前处理

Maldi-tof最后上机测试时是固体状态测试,但是在之前都需要对样品进行溶解,目的是让样品和基质能有效混合,在这个处理过程中需要有几个注意事项:

▶▶待测样品最后是需要能干燥的,如果最后还是流动状态则不行,因为样品测试环境是高真空,不能有挥发物。

▶▶ 样品处理时候可以尽量偏酸性,有利于电子流转,并且多数的基质也是属于有机酸类,碱性会抑制基质的效果。

上述内容介绍了Maldi-tof(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)技术的常见测试类型及其参考测试条件。需注意的是,在仪器测试过程中,除设备本身的性能外,测试条件对结果的影响亦不可忽视。合理选择测试参数往往能够显著提升测试效率,实现事半功倍的效果。

文字:小谭谈检测

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创建时间:2025-07-29 13:34
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