深入解析GPC绝对分子量测试中的dn/dc计算方法

流动样品的浓度可通过任何在线浓度检测器（如紫外/可见光吸收检测器、示差折光检测器或荧光检测器）进行测定，这是一种直接、经典且准确的方法。这个方法的核心原理就是公式:Δn=(dn/dc)×c

当样品溶剂与流动相溶剂一致时，在低浓度范围内，溶液的折光指数与浓度呈线性关系:

Δn=n-n₀=(dn/dc)×c

其中Δn是示差折光检测器测得的信号(溶液与纯溶剂的折光指数差)。n是溶液的折光指数。n₀是纯溶剂的折光指数。c是样品的质量浓度(通常为:g/mL)。

通过测量一系列已知浓度样品的Δn，然后进行线性拟合，其斜率就是 dn/dc 值。

当溶解样品的溶剂与流动相不一致时，推荐使用该方法。

如果在实验配置中启用了“假设100%质量回收率”选项，将假设100%的进样质量在所选的峰区域内洗脱。此外，必须已知以下信息：

（1）每个峰的总洗脱质量（假设等于进样质量）。

（2）检测器的校准常数 α。

（3）足够准确的流速。

可运用以下方法进行计算：

其中 V 和 V_baseline 分别是 RI 信号和基线电压；ΔVi为切片体积。

此方法必须确保所有进样质量都在所选峰区域内洗脱，并且流速准确。

在实际检测中，对于许多溶质和溶剂而言，dn /dc的值可以在文献中找到，或通过计算溶质各成分 dn /dc 值的加权平均值得出，或者通过使用Optilab进行经验性测量获得。若同时使用 RI 和 UV 检测器，待测样品的dn/dc 可在线估算：

（1）若已知样品消光系数，ASTRA 软件根据UV 信号可以计算其真实洗脱质量；

（2）以洗脱质量替代进样质量， ASTRA 软件根据RI信号可以计算dn/dc 值；

（3）利用 UV 检测器，无需假设样品100%被洗脱出来。